Ce este testul de endotoxine?
Endotoxinele sunt molecule hidrofobe care fac parte din complexul lipopolizaharidic care formează cea mai mare parte a membranei exterioare a bacteriilor Gram-negative.Ele sunt eliberate atunci când bacteriile mor și membranele lor exterioare se dezintegrează.Endotoxinele sunt considerate ca fiind principalii contributori la răspunsul pirogenic.Și produsele parenterale contaminate cu pirogeni pot duce la dezvoltarea febrei, inducerea răspunsului inflamator, șoc, insuficiență de organ și moarte la om.
Testul de endotoxine este testul pentru detectarea sau cuantificarea endotoxinelor din bacteriile Gram-negative.
Iepurii sunt folosiți pentru a detecta și cuantifica endotoxinele din produsele farmaceutice la început.Potrivit USP, RPT implică monitorizarea creșterii temperaturii sau a febrei după injectarea intravenoasă a medicamentului la iepuri.Și 21 CFR 610.13(b) necesită un test de pirogen la iepure pentru produse biologice specificate.
În anii 1960, Fredrick Bang și Jack Levin au descoperit că amebocitele crabului potcoavă se vor coagula în prezența endotoxinelor.TheLizat de amebocite Limulus(sau Tachypleus Amebocyte Lysate) a fost dezvoltat în consecință pentru a înlocui majoritatea RPT.Pe USP, testul LAL este denumit testul endotoxinei bacteriene (BET).Iar BET ar putea fi realizat folosind 3 tehnici: 1) tehnica gel-cheaguri;2) tehnica turbidimetrică;3) tehnica cromogenă.Cerințele pentru testul LAL conține pH optim, putere ionică, temperatură și timpul de incubare.
În comparație cu RPT, BET este rapid și eficient.Cu toate acestea, BET nu a putut înlocui complet RPT.Deoarece testul LAL poate fi interferat de factori și nu poate detecta pirogenii non-endotoxini.
Ora postării: 29-dec-2018
