Aplicarea tehnicii cromogene la testul de endotoxine bacteriene

Tehnica cromogenă se numără printre cele trei tehnici care conțin și tehnica gel-cheag și tehnica turbidimetrică pentru a detecta sau cuantifica endotoxinele din bacteriile Gram-negative prin utilizarea lizatului de amebocite extras din sângele albastru al crabului potcoave (Limulus polyphemus sau Tachypleus tridentatus).Ar putea fi clasificat ca un test cromogen al punctului final sau un test cromogen cinetic bazat pe principiul particular al testului utilizat.

Principiul de reacție este că: lizatul de amebocite conține o cascadă de enzime serin protează (proenzime) care pot fi activate de endotoxine bacteriene.Endotoxinele activează proenzimele pentru a produce enzime activate (numite coagulază), aceasta din urmă catalizează scindarea substratului incolor, eliberând un produs pNA de culoare galbenă.PNA eliberat poate fi măsurat fotometric la 405 nm.Și absorbanța este corelată pozitiv cu concentrația de endotoxină, apoi concentrația de endotoxină ar putea fi cuantificată în consecință.


Ora postării: 29-sept-2019